【J Immunother Cancer】苏长青/钦伦秀专业团体反映嵌合溶瘤腺病菌攻陷实体模型肺部肿瘤的协同作战逻辑

 

溶瘤病毒（OV）介导的基因治疗是一种重要的新兴癌症治疗策略_[1]，研究表明，OVs感染的癌细胞会分泌大量细胞因子，而被裂解的肿瘤细胞会释放多种肿瘤相关抗原。溶瘤病毒治疗不仅可以触发免疫应答，而且可以改变肿瘤微环境，促进化疗和放疗的效果，提高免疫检查点抑制剂治疗和免疫细胞治疗的疗效_[2]。

 溶瘤腺病毒（OAVs）作为携带抗癌基因的载体，可以在癌细胞内严格启动病毒复制，进而实现高拷贝扩增和高效表达抗癌基因，从而实现病毒复制溶瘤和基因表达抑瘤的双重抑癌作用而不影响正常细胞。然而，OAV的靶向肿瘤特异性和抗癌作用在实践中尚未达到预期，单独使用OVs治疗的临床结果仍不能令人满意。

 

近期，海军军医大学苏长青团队与复旦大学华山医院钦伦秀团队合作在Journal for ImmunoTherapy of Cancer杂志上发表题为Triple-serotype chimeric oncolytic adenovirus exerts multiple synergistic mechanisms against solid tumors的研究论文，苏英晗博士和黎江博士为该文共同一作。研究团队设计具有多种协同抗癌活性的嵌合OAV（OncoViron），文章详细阐述了三血清型嵌合溶瘤腺病毒对实体肿瘤发挥多种协同机制_[3]。

OncoViron是一款多重机制协同和增效免疫治疗的嵌合型广谱溶瘤腺病毒，具有三重肿瘤靶向调控机制、三个病毒结构基因改造、三种血清型腺病毒嵌合、三类抗癌免疫基因装载的特点。OncoViron优势:(1)针对癌细胞的病毒复制在转录水平和翻译水平上都有精确的调控;(2)多个病毒结构蛋白的固有抗癌活性被激活;(3)感染癌细胞的能力增强，保证病毒本身不被已有的中和抗体拦截及肝细胞吸附;(4)武装三种抗癌免疫调节基因，增强杀死癌细胞的效果。
 

 

结果

01  OncoViron具有较高的肿瘤选择性复制活性

  制定工人制定的OncoViron会会选择癌症催化活性朋友运行子对癌症组织组织会会记忆性剪切，ODDpcb板做为DNA启闭在全文翻译级别下限制合适组织组织中的宏病毒是什么码剪切。Ad5/Ad11纤毛嵌合宏病毒是什么码Ad5SVPF11及所有带着单、双或几种组织组织要素的宏病毒是什么码均能在繁多直营线癌症组织组织中高仿制剪切。体内组织组织实验英文可是揭示，OncoViron在还包括肝癌、乳房癌、胆囊癌、肝癌等很多直营线瘤组织组织系中呈高仿制增值，而在合适组织组织系中增值催化活性较低 (图1)。  

图1 OncoViron肿瘤细胞特异性的增殖复制

02  纤毛Ad5F11与六邻体Ad5H48的嵌合增强OncoViron的感染性

  柯萨奇hiv蠕虫宏宏细菌样本腺hiv蠕虫宏宏细菌样本血清激酶(CAR)是Ad5的血清激酶，对匮乏CAR的骨髓造血肉瘤神经元、造血干肉瘤神经元、树突状肉瘤神经元、局部肉瘤肉瘤神经元通常是肉瘤干肉瘤神经元等感梁热能力很低。B组腺hiv蠕虫宏宏细菌样本则最主要正常认别是一种宽泛表答的补体的调节血清CD46。按照B组腺hiv蠕虫宏宏细菌样本的纤毛血清(fiber knob)代替品Ad5纤毛血清，Ad5纤毛与Ad11纤毛嵌合导致嵌合纤毛血清Ad5F11来创造出一个嵌合hiv蠕虫宏宏细菌样本，使之增长正常认别CD46血清激酶的效果，有益于于提升hiv蠕虫宏宏细菌样本对肉瘤肉瘤神经元感梁热能力。   流式的受损肿瘤血细胞系术(FCM)察觉，在通常数癌受损肿瘤血细胞系株中，CD46的展现平均水平远超CAR(图2A)，而Ad5F11嵌合病菌Ad5SVPF11H48-DsRed在通常数癌受损肿瘤血细胞系株中的感然性显然远不如Ad5纤不足菌Ad5SVPH48-EGFP。Ad5F11嵌合明显明显增强了OAV在通常数癌受损肿瘤血细胞系中的感然意识。   Ad5在自然的界会出现更广，很许多人已被皮肤沾染并出现了中合抵抗能力，就能够阻拦同样血清型的木马木马电脑病毒，探析工作人员将腺木马木马电脑病毒护壳球蛋白Hexon的高变区(HVR)与稀流血清型如Ad48腺木马木马电脑病毒的Hexon相应的板块展开嵌合，两栖动物检测证明Ad5H48嵌合使OncoViron能失去自我不存在的免疫細胞中合抵抗能力的阻拦，肝細胞对OncoViron的润湿性和皮肤沾染也同质性避免（图2）。  

图2 纤毛Ad5F11与六邻体Ad5H48嵌合增强OncoViron的感染性

 

03  OncoViron介导抗癌细胞因子的高表达且影响肿瘤细胞的转录表达谱

  论述人士以MOI＝5pfu/cell的感化挠度进入OncoViron对其进行体细胞感化，不断教育培养24h、48h、72h后，持续上清，在ELISA方法步骤的检测IL‑12、IFN‑γ、CCL5基因组核蛋白质传达出来爱情况报告。然而出现，OncoViron也可以介导IFN‑γ、IL‑12、CCL5核蛋白质优质传达出来爱，有时候时时间延长时间传达出来爱量日益提升。   进1步探究OncoViron对组织内部核核转录传达方法谱的影响到，察觉对比分析传达方法基因遗传(DEGs)重要含有于组织内部核核全过程的局灶黏附和吐噬体的工作，还有PI3K-Akt、组织内部核核系数-组织内部核核系数多巴胺受体相互之间影响和MAPK环路（图3）。  

图3 OncoViron介导抗癌细胞因子的高表达且影响细胞转录谱

 

04  OncoViron诱导肿瘤选择性杀伤活性

  即时細胞探讨显示OncoViron对所有实体模型淋巴肿瘤細胞系均有不错的細胞毒边际效果，且呈标准容量边际效果和事件边际效果相互影响。在大往往数癌細胞系中，两类血清型腺新冠电脑病毒嵌合的OncoViron比有两种血清型腺新冠电脑病毒嵌合的Ad5SVPF11-C3表現出更强的溶瘤活性酶类（图4）。  

05  OncoViron在肿瘤动物模型中发挥抗癌作用

  OncoViron对很多小平面淋巴淋巴良性肿瘤存在比较好的疗法癌症化学活化氧，在对小鼠移殖瘤模板瘤内肌注调查显示，OncoViron疗法既淋巴淋巴良性肿瘤体组织细胞繁衍化学活化氧减退，然而侵润性天然免疫检测体组织细胞个数多，显示淋巴淋巴良性肿瘤天然免疫检测微场景发生了了很大优化（图5）。  

图5 OncoViron在肿瘤模型中发挥抗癌作用

06  OncoViron联合免疫治疗可协同抑制肿瘤生长

  理论研究员用C57-hPD1人源化小鼠打疫苗小肠癌受损神经元MC38，搭建移植成功瘤沙盘模型测量PD-1抗体阳性，单药和合力使用药量物小动物实验性查证OncoViron与PD-1抑制效应剂Keytruda合力使用药量物具备着联动降本增效的效应。免役组化信息显示，在OncoViron生长和表达方法mE1a的一个地域，肺部肿瘤组织安排面积计算萎缩，带有腮腺受损神经元、四核cpu巨噬受损神经元、树突状受损神经元(DCs)、成玻纤受损神经元集结，导致TME中的第3腮腺样构成，对癌受损神经元发挥着原位联动破坏效应，然而提升免役诊疗的效用（图6）。  

图6 OncoViron联合PD-1抗体对移植瘤模型具有协同抗癌作用

  我进那步搭配CAR‑T人体肿瘤细胞，而且搭配各种不同癌症爬行动物模板去单药和联席调理调理，成果表述OncoViron属实是可以增进CAR-T人体肿瘤细胞的繁衍和侵润，导致一项一体化长效机制，偏态提高了调理使用效果（图7）。  

图7 OncoViron联合CAR–T对移植瘤模型具有协同抗癌作用

 

结论

 本文研究发现OncoViron的选择性复制介导抗癌因子的高表达，特异性靶向多种实体肿瘤，显著抑制癌细胞增殖。在免疫缺陷小鼠、免疫增强小鼠和人源化小鼠的多种植入实体肿瘤模型上，OncoViron自身以及与程序性死亡1 (PD-1)抗体和嵌合抗原受体(CAR)T细胞联合显示了巨大的抗癌作用。OncoViron显著改变了受感染癌细胞的基因表达谱，不仅招募大量淋巴细胞、自然杀伤细胞和单核巨噬细胞进入肿瘤微环境(TME)，并激活免疫细胞，特别是T细胞，且诱导巨噬细胞M1极化并促进更多免疫细胞因子的释放，从而重塑TME以配合PD-1抗体或CAR-T治疗。嵌合OncoViron是一种新型广谱抗癌产品，具有多种协同和增强免疫治疗机制，为联合免疫治疗实体肿瘤创造了良好的机会。   


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参考文献：

[1] Heidbuechel JPW, Engeland CE. Oncolytic viruses encoding bispecific T cell engagers:a blueprint for emerging immunovirotherapies.J Hematol Oncol 2021;14:63.

[2] Nishio N, Dotti G. Oncolytic virus expressing RANTES and IL-15 enhances function of CAR-modified T cells in solid tumors. Oncoimmunology 2015;4:e988098.

[3] Yinghan Su, Jiang Li.,et al. Triple-serotype chimeric oncolytic adenovirus exerts multiple synergistic mechanisms against solid tumors.J Immunother Cancer.2022 May;10(5):e004691.doi: 10.1136/jitc-2022-004691.