最近几天各种类型宫廷式共虐刷屏，接下来出得戏，来要了解五款 “网紅”m6A。老百姓老是做梦就出现mRNA有着腺嘌呤上的甲基化遮盖（m6A）。越多越好越多越好的出轨证据意味着高级生物工程mRNA和lncRNA上单一化有m6A遮盖，近几年来出现mirRNA、cirRNA及rRNA都有这类遮盖。
N6-甲基腺嘌呤(N6-methyl-adenosine(m6A))是高等专科学校生物体中含锌量相对比较丰富多样的属于RNA甲基化主要形式，均衡每一个条mRNA含有3-6个，出现于单纯字段RRACH（R=G ,A; H=A,C or U）的腺嘌呤上。其系统由“辨认码器”（Writer）、“读码器”（Reader）及“消码器”（Eraser）推进起效应。辨认码器（Writer）即甲基移动酶METTL3、METTL14等，消码器（Eraser）可逆反应转甲基化有FTO、ALKBH等，m6A由m6A配合核蛋白质（读码器（Reader））辨认，当前察觉的有YTH等结构类型域核蛋白质。
这种修饰是可逆的，通过甲基转移酶METTL3、METTL14，去甲基转移酶FTO和ALKBH5调控其生物学特性。m6A修饰在基因表达调控中起着重要作用，如转录水平上调控RNA稳定性、运输、剪切等1。研究表明m6A mRNA甲基化影响干细胞和癌细胞的生长和增殖2-4。然而，m6A甲基化如何影响细胞生长以及哪些潜在途径和机制调节这些变化仍未得到充分阐明。
不过近期基霍华德-休斯医疗探索所和旧金山大学考研的Chuan He和Ernst Lengyel在《自然是血内部怪物学》上撤稿了最新信息的探索结果。低平行的m6A mRNA甲基化完成后果AKT预警径路有利于宫颈內膜癌血内部的分裂繁殖和致瘤性。
效果
1.低水平m6A mRNA甲基化与子宫内膜癌的发生密切相关
深入浅析看到良性癌肿团体结构中m6A迁移酶符合体价值体系亚基METTL14的298位点一直变动的，引发甲基迁移酶工作灭活，抑止mRNA总的m6A甲基化级别。这对于普通团体结构，70%的良性癌肿（具有METTL14纯天然型）都存在总m6A mRNA甲基化级别走低。(Fig. 1a-e)。RT-qPCR测试看到与相互邻近的普通团体结构不同之处，癌团体结构中m6A甲基迁移酶METTL3的体现偏态走低(Fig. 1f)。METTL3的体现与良性癌肿团体结构中m6A mRNA甲基化级别正相关内容。免疫力组化在蛋白酶级别上达到同样的結果(Fig. 1g)。一并深入浅析人看到良性癌肿团体结构中METTL14变动的与METTL3的体现缩短并不相融的，METTL14变动的METTL3的体现可是普通的。肠癌DNA组图谱TCGA数据源浅析界面显示两种沒有看不出的相关内容性。結果证明大部位的子宫的內膜厚度癌都的表现出犹豫METTL14变动的或METTL3的体现缩短而引发的低级别的m6A mRNA甲基化。
图1 METTL14变异及METTL3表达爱下滑才能减少宫腔內膜癌用户的m6A mRNA甲基化水准
2.异常m6A甲基化促进子宫内膜癌细胞的增殖
m6A甲基化的水平与细胞生物学特性相关，尤其是对关键转录因子甲基化的影响。为了研究METTL14功能缺失对肿瘤细胞系的影响。研究人员用CRISPR技术敲除HEC-1-A（子宫内膜癌细胞系）中METTL14。蛋白质印迹和测序分析可知敲除细胞系都是杂合敲除。METTL14 /–敲除细胞系中m6A甲基化水平下降和肿瘤样本中观察到的结果一致(Fig. 2a)。同时发现促进细胞的增殖、克隆形成、细胞迁移和浸润（Fig. 2b-e）。病毒介导的RNA干扰敲低HEC-1-A细胞系中METTL3的表达与METTL14 /–得到的结果一致（Fig. 2f-j）。
为了验证体外细胞系观察到的表型，作者进一步研究了体内METTL14 /–和METTL3对肿瘤发生的影响。将野生型HEC-1-A细胞系和METTL14 /–敲除HEC-1-A细胞系分别注射到裸鼠的腹腔膜，2-3周后观察肿瘤的大小和数量。注射METTL14 /–敲除细胞的小鼠成瘤更大转移数量更多（Fig. 2k）。在注射野生型和突变METTL14上（Fig. 2l）以及敲低METTL3和对照细胞的裸鼠上观察到相似的趋势（Fig. 2m）。
图2 低水准m6A甲基化有助于组织的繁殖、搬迁并且活机体淋巴肿瘤的生長
3.m6A-seq检测出子宫内膜肿瘤中甲基化改变的转录
探讨师对来自于缺乏淋巴肉瘤组建和相距普通 组建做m6A-seq加测数据分析，出现m6A基线在淋巴肉瘤组建中只是普通 组建的很多（Fig. 3a）。m6A甲基化减轻的转录本核心含有在与内部挪动、繁殖、成长、黏附性和内部枯死想关的基因遗传核心（GO）位址。在敲低METTL3 和METTL14突然变化的的HEC-1-A内部系也收获相同的结杲。
图3 癌肿阻止m6A甲基化情况减退
4.m6A甲基化调控AKT信号通路的激活
AKT电磁波通道带动神经细胞膜的存留和出现，在宫腔内膜癌和其他的肺癌在有害突变性更改密码。的研究分析察觉到与日常毗邻集体比起来，良性肿瘤中参入AKT经由的多个染色体出现出m6A甲基化极大减少（Fig. 3c,d）。的研究分析察觉到METTL14功用缺损的hec-1-a神经细胞膜系与比比起来，AKT丝氨酸(S473)磷过酸平均含量特殊上升(Fig. 4a)。苏氨酸和总AKT蛋白质体现平均含量没能调整。AKT磷过酸的这样的的变化畅快AKT电磁波，会导致AKT上中游调节作用要素的磷过酸的上升(Fig. 4b)。说低平均含量的m6A甲基化在磷过酸更改密码AKT电磁波通道。
图4 避免的m6A甲基化更改密码AKT
5.m6A甲基化控制AKT激活调控因子的表达
进一歩深入分析PHLPP2（编写代码血清磷酸酶，AKT去磷过酸解离）和mTORC2（属于磷过酸AKT的激酶）来明确低技术方向m6A甲基凝成用下AKT刺激启动的体系。编写代码PHLPP2和mTORC2黏结体（PRR5、PRR5L和mTOR）的转录本在人样板中也凸显m6A甲基化的减低（Fig. 4c）。在某些细胞核系中，查看到PHLPP2血清的传达减低，此其mRNA技术方向没能特别变换；相反的词语，p-mTOR（mTORC2的标记符号）除非血清质技术方向增多，PRR5、PRR5L和mTOR的mRNA传达也增多（Fig. 4a,d）。免疫抗体组化最终结果PHLPP2在淋巴肿瘤组建中我觉得下调（Fig. 4e,f）。
现在来研究探讨m6A甲基化如何快速控制PHLPP2和mTORC2的表现。木马病毒介导在HEC-1-A細胞系中敲低YTHDF1（阅览蛋白酶的属于促进会m6A的转录和翻译资料英语）真的以增多了PHLPP2的表现(Fig. 5a)。PHLPP2表现的这样变幻不算因PHLPP2转录本用户变幻，即使因激活码PHLPP2转录核糖体的变幻（Fig. 5a,c）。而PRR5、PRR5L和mTOR的转录虽是受YTHDF2（介导mRNA转录本化学降解塑料）的危害（Fig. 5d,e）。电磁波辐射结果显示得知以增多的m6A甲基化减退YTHDF1对PHLPP2（AKT负控制调）促翻译资料英语，以增多YTHDF2对mTORC2（AKT正控制）转录本的化学降解塑料。
图5 m6A运用蛋白酶调空AKT环路有关DNA传达
6.低m6A甲基化增加AKT信号促进细胞增殖
进这一步设计证明怎么写的女人子宫廷之內膜癌体上皮细胞中少的甲基化能够 激活开通AKT来促进会分裂繁殖。过理解PHLPP2和降底mTORC2（敲低mTORC2的核心基因遗传RICTOR）都少了AKT磷酸性反应的的水平，最后降底了原因敲低METTL3，基因突变METTL14和METTL14 /-等引发的女人子宫廷之內膜癌体上皮细胞系HEC-1-A的分裂繁殖（Fig. 6）。
图6 低水准m6A监测AKT网络信号反应受损细胞繁殖
选取文献综述
1.Liu, N. et al. N6-methyladenosine-dependent RNA structural switches regulate RNA–protein interactions. Nature 518, 560–564 (2015).
2.Geula, S. et al. Stem cells. m6A mRNA methylation facilitates resolution of naïve pluripotency toward differentiation. Science 347, 1002–1006 (2015).
3.Batista, P. J. et al. m6A RNA modification controls cell fate transition in mammalian embryonic stem cells. Cell Stem Cell 15, 707–719 (2014).
4.Zhao, B. S. et al. m6A-dependent maternal mRNA clearance facilitates zebrafish maternal-to-zygotic transition. Nature 542, 475–478 (2017).
