哪种是内毒物？
内毒性(Endotoxin)：又称为脂多糖(Lipopolysaccharide, LPS)，由脂质A、菌体特异形多糖和非特异形中心多糖四部分造成，是革兰氏阴沙门氏菌肿瘤细胞壁壁上的结构材质，组织EU/mL。内内毒素对宿体是有毒的性的，脂质A是内内毒素的重要毒素类物质。
图1 内毒性分子式节构（蓝色方框一样,小图片源于学习医学文献4）
rAAV载体中为什么会含有内毒素？
内毒素的释放是由细菌死亡自溶或粘附在其他细胞时造成的，也会发生在正常细胞生长和分裂过程中。在rAAV载体制备过程中，内毒素污染主要有两种来源：细菌内毒素和环境内毒素。由于rAAV生产所需要的质粒DNA是从大肠杆菌中分离提取的，因此质粒DNA可能含有少量内毒素；同时，rAAV制备过程中需转染293T细胞，而细胞的生长分裂可能也会带来内毒素的产生；此外，生产过程中的环境污染可能亦会引入内毒素。
rAAV载体中的内毒素如何检测？
据药材制造的制约规则要求，应用于鲎免疫化学试剂的内内内黑色素检测工具是检测工具内内内黑色素残余的金规则。鲎也是种大海节肢哺乳动物，自身呈青黄褐色，血中呈淡紫色，鲎的血中一碰见疾病才会疑固。从而，老百姓参与这优点开拓出鲎免疫化学试剂，行将鲎血中中的出现变形细胞膜参与充分均匀融掉，将充分均匀融掉物制出含能被进样器内内内黑色素激活卡的疑固酶原物品，经过断定内内内黑色素影响的发浑边际效应软件测试内内内黑色素含磷量。
一般而言，鲎生化化学制剂退行癌细胞液体交连在线检验法的灵敏度是0.06个行业的内毒性EU/mL。測試供试品用重蒸水两倍摇匀利用，在线检验法生化化学制剂（11uL）建立到rAAV液体，致力于在37℃，60min，试管在线检验胶块的出现了，在线检验阳性反应和呈阴性然而。
内毒素对宿主的影响
内毒素对宿主是有毒性的，即使是少量的内毒素也可能会诱导宿主产生免疫反应。内毒素可以与细胞膜上的受体结合引起免疫反应，激活组织内的炎性细胞和炎症因子的释放，对细胞有较强的毒性作用，影响体内外细胞的生长和功能。在体内环境下，内毒素作用于哺乳动物，可导致机体发热，引发全身性炎症反应，继而引起弥散性血管内凝血、休克、多脏器功能衰减等，最终导致死亡。因此，无论是涉及病毒载体的实验研究还是临床应用，我们都需要尽量去除载体的内毒素。
如何有效去除rAAV载体中内毒素
在病毒的生产中，内毒素的去除包括亲和层析、缓冲液洗涤等方法，亲和层析法去除内毒素具有耗时、成本高、载体回收率差等缺点。缓冲液洗涤法则是借助超滤或离子交换色谱分离LPS胶束，经过多次缓冲液交换洗涤，再用低速离心浓缩病毒培养液的方式去除rAAV载体内毒素，该方法目前在部分rAAV血清型中适用。无论哪种方法都有一定的局限性，因此，从源头上去除内毒素至关重要。
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可以参考论文资料
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