外泌体速递单号查询 | 中药材补救导致的外泌身体素质减弱肺部肿瘤肿瘤细胞的增值

背景

中药既是历史上重要的治疗药物，也是新药的重要来源。常山酮（HF）是一种由热敷皂苷衍生而来的小分子生物碱，在不同的细胞系中具有明显不同的抗增殖作用。然而，HF在体外是能抑制MCF-7细胞的生长以及这一过程的潜在机制尚不清楚。

外泌体是一种由细胞自然分泌的纳米大小的囊泡，大小在30-150nm。它由各种脂质、蛋白质和RNA组成，包括microRNAs（miRNAs），这些分子通过外泌体可以在细胞间传递，起到了直接或间接的通讯作用。

本文[1]作者发现HF不仅能抑制MCF-7细胞外泌体的分泌，同时降低了外泌体中microRNA-31（miR-31）的含量。MiR-31通过靶向HDAC2，进一步调节细胞周期调节蛋白的水平，有助于HF的抗癌功能。

Results
1.HF对人乳腺癌细胞MCF-7生长的影响    

为了更好地研究性HF是不是也对MCF-7人体癌组织细胞的生张期导致引响，小说作家配置的不同于的HF质量氧浓度（25、50、100、200和400nM）和的不同于的时期段点（0、12、24和48hr），并确认MTT和克隆行成查重人体癌组织细胞的生张期具体情况。工作数据源反映，HF对身体之外陪养的MCF-7人体癌组织细胞的生张期存在质量氧浓度反功效性和时期段反功效性的抑制性功效（Figure.1）。
 

Figure 1 HF能调控科学家甲状腺癌症膜MCF-7的分裂繁殖

2.HF处理可减少MCF-7细胞的外泌体分泌

以便认可中药配方什么情况下控制作用MCF-7癌神经生殖细胞系的外泌体的排泄，做者用HF治疗MCF-7癌神经生殖细胞系并测试了癌症癌神经生殖细胞系训练上清的外泌规模。做者马上又依次测试了AChE酶活（这种与外泌体膜想关的特有酶）、BCA含量、散发出电镜（TEM）及外泌体球蛋白（Tsg101、CD63、CD81和CD9），经过许多数据文件，做者看到HF可控制作用MCF-7癌神经生殖细胞系外泌体的的排泄（Figure.2）。
 

Figure 2 HF处置可少MCF-7外泌体的产生
 

3.HF通过抑制外泌体的分泌来抑制MCF-7细胞的增殖

创著者先用DiD有机染料箭头MCF-7内部的分秘量的外泌体，再将凡此种种泌体与MCF-7内部共教育培养，共对焦二氧化碳激光扫一扫电子显微镜了解到外泌体分布图在MCF-7内部质中。后来创著者用不一分子量的外泌体来操作MCF-7内部，合用MTT法查测MCF-7内部的分裂繁殖现状。创著者察觉到，现在分子量的增大，MCF-7内部的分裂繁殖也现在升高。然后创著者观察了HF和GW4869（本身碱式盐脑神经鞘磷脂酶能够抑药品）境内外泌体的分秘量的影向。统计资料体现了，经GW4869预操作后，HF对MCF-7内部的分秘量外泌体的能够促使做用将更清晰。凡此种种，用HF和non-HF外泌体操作MCF-7内部，结局现示，HF对MCF-7内部分裂繁殖的能够促使做用减少。一直以来，此类统计资料论述了HF能够促使外泌体的分秘量可能性是HF能够促使MCF-7内部种植的机理（Figure.3）。
 

Figure 3 MCF-7特征的外泌体对血细胞增值能力的的影响

​4.HF通过降低外泌体miR-31抑制MCF-7增殖

笔者检查测量了外泌体中84个与乳房增生癌想关的miRNAs，遇到MCF-7受损体神经细胞核膜在有HF办理和没HF办理下外泌体中的miRNAs有大有差异，至少miR-31在HF办理过的外泌体中比non-HF办理的外泌体中更加少了。继而笔者敲低了外泌体中的miR-31，将另外泌体添加多巴胺受体受损体神经细胞核膜养育基中，遇到敲低miR-31后外泌体对受损体神经细胞核膜分裂繁殖的调节功效激发。之后笔者过表示了外泌体中的miR-31，遇到外泌体提高网站会受损体神经细胞核膜的分裂繁殖。故而，等数据分析发现外泌体miR-31能够提高网站会MCF-7受损体神经细胞核膜分裂繁殖（Figure.4）。
 

​Figure 4 外泌体miR-31能有利于促进MCF-7癌细胞的增值能力

5.miR-31通过靶向HDAC2调节MCF-7细胞的生长

创作者各是用miR-31 inhibitor、mimics或HF的刺激MCF-7血血人体生殖内部，来变MCF-7血血人体生殖内部外分泌的外泌体中miR-31的程度，用shotgun LC-MS/MS球核蛋白组学技术设备监测核蛋白激酶血血人体生殖内部MCF-7中核球核蛋白的差距表示实际情况。然而提示，表示了miR-31 pre-miRNA的外泌体可控制HDAC2的表示。于此，miR-31敲低/过表示或HF加工过的外泌体调准节HDAC2的表示和H3、H4乙酰化的调涨或调低。控制HDAC2的表示可分明控制MCF-7血血人体生殖内部的上升传输率。肯定，某些然而体现了miR-31依据靶向药物HDAC2调准MCF-7血血人体生殖内部的产生（Figure.5）。
 

​Figure 5 miR-31采用靶向药物HDAC2可以抑制MCF-7肿瘤细胞的繁衍
 

6.HDAC2通过靶向MCF-7细胞中的G1/S组分对细胞周期环路起调控作用

作者接着检测了HDAC2对细胞周期的调控作用。HDAC2敲低后会使G1期细胞增加，S期和G2/M期减少，这说明了HDAC2参与了细胞周期时钟的调控。在MCF-7细胞G1/S过渡过程中，HDAC2敲低可以抑制细胞周期的组分水平，包括cyclin D1和CDK2，同时增加细胞周期负调控因子p21的水平。此外，HDAC2敲低通过CDK2和cyclin D1转录激活影响pRb（retinoblastoma protein）蛋白磷酸化。

随后作者也检测了用HF或miR-31 pre-miRNA处理细胞后其分泌的外泌体对cyclin D1、CDK2和p21的影响。结果发现，与non-HF外泌体处理组相比，HF外泌体能抑制cyclin D1、CDK2水平，同时提高p21水平；与对照组相比，来自miR-31 pre-miRNA处理MCF-7细胞产生的外泌体降低p21水平、增加CDK2和cyclin D1水平（Figure.6）。
 

Figure 6 HDAC2进行靶向药物G1/S转化率调低酚类化合物可抑制甲状腺癌人体细胞的衍生

虽然，某些最后蕴含了HF加工处理会削减MCF-7组织受损細胞外泌体的保持（是指miR-31），该外泌体可转回miR-31到挨近组织受损細胞，能够仰制HDAC2抒发。也HDAC2可进行设定G1/S酚类化合物，如p21、CDK2和cyclin D1来设定组织受损細胞时间，可以仰制MCF-7组织受损細胞繁殖(Figure.7）。
 

Figure 7 微环境中HF促使MCF-7血细胞繁殖的考核机制
 

稿件汇总

考生文献

[1] miR-31 shuttled by halofuginone-induced exosomes suppresses MFC-7 cell proliferation by modulating the HDAC2/cell cycle signaling axis. J Cell Physiol. 2019 Aug;234(10):18970-18984.doi: 10.1002/jcp.28537. Epub 2019 Mar 27.